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鹽酸克林霉素含量測(cè)定和碘海醇水解物的分析
更新時(shí)間:2023-09-13   點(diǎn)擊次數(shù):1209次

1. 鹽酸克林霉素含量測(cè)定  參考《中國(guó)藥典》(2020版)


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鹽酸克林霉素 M.W. 461.444


按照20版藥典鹽酸克林霉素含量測(cè)定項(xiàng)下方法,使用CAPCELL PAK C18 MGII色譜柱,對(duì)供試品進(jìn)行了分析,結(jié)果如圖1圖2所示。

供試品分析結(jié)果中,主峰保留時(shí)間11.013min,與相對(duì)保留時(shí)間0.8的7-差向克林霉素峰(8.988min)分離度為6.17,相對(duì)保留時(shí)間0.65的克林霉素B峰(7.247min)與7-差向克林霉素峰分離度為6.817,均能夠滿足藥典分離度不低于3的要求。

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圖1 鹽酸克林霉素分析結(jié)果

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圖2 局部放大圖

【色譜條件】

色譜柱:CAPCELL PAK C18 MGII S5; 4.6×250

流動(dòng)相:以磷酸二氫鉀溶液(每1 mL中含磷酸二氫鉀6.8 mg,用25%的氫氧化鉀溶液調(diào)節(jié)pH值至7.5)/ 乙腈 = 55 / 45

動(dòng)速:1.0 mL/min

動(dòng)度:35 °C

動(dòng)測(cè):PDA 210 nm

動(dòng)度:供試品溶液 1 mg/mL(甲醇)

進(jìn)樣量:20 µL

結(jié)     論

使用CAPCELL PAK C18 MGII色譜柱可在藥典條件下,實(shí)現(xiàn)鹽酸克林霉素含量測(cè)定分析,分離度及保留時(shí)間符合藥典要求。


2. 碘海醇水解物的分析

客戶提供了碘海醇水解物(固體),并反映使用Y公司的ODS-AQ柱做該項(xiàng)目色譜柱壽命短,希望本實(shí)驗(yàn)室能夠篩選出對(duì)碘海醇水解物具有良好分離,同時(shí)還能有良好的使用壽命的色譜柱。

使用CAPCELL PAK C18 MGII色譜柱進(jìn)行了分析,按照客戶提供方法,對(duì)碘海醇水解物的分析結(jié)果見圖3和表1。主峰前分離出兩個(gè)比較明顯的雜質(zhì)峰,且兩個(gè)雜質(zhì)以及雜質(zhì)與主峰之間的分離度均大于1.5。

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圖3  C18 MGII色譜柱分析結(jié)果


表1   各峰積分結(jié)果表

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【色譜條件】

色譜柱:CAPCELL PAK C18 MGII S3; 4.6×250

流動(dòng)相:A,0.05%三弗乙 酸水   B,三弗 乙 酸 / 乙腈 / 甲醇 = 0.05 / 50 / 50

         B% 1%(0 min)-10%(42 min)-75%(53 min)-75%(58 min)-1%(58.01 min)-1%(70 min)

動(dòng)速:0.6 mL/min

動(dòng)度:45 ℃

動(dòng)測(cè):UV 254 nm

進(jìn)樣量:15 µL

動(dòng)度:1 mg/mL(溶劑為甲醇:水=1:99)


結(jié)     論

使用CAPCELL PAK C18 MGII色譜柱,按照客戶提供分析方法,對(duì)碘海醇水解物供試品進(jìn)行分析,分離度較好。

流動(dòng)相條件中,梯度起始有機(jī)相比例僅為1%,因此在不同設(shè)備上可能會(huì)出現(xiàn)保留時(shí)間和分離度上略有差異的情況。建議適當(dāng)調(diào)整梯度中有機(jī)相的起始比例,并在色譜柱使用完后及時(shí)進(jìn)行沖洗,以減少高水相流動(dòng)相可能對(duì)色譜柱帶來的損傷。



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